Злокачественный отёк. Что такое злокачественный отек, профилактика и лечение

19. ПАРАНОИДНАЯ РЕГРЕССИЯ И ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫЙ НАРЦИССИЗМ Как я уже упоминал (см. главу 12), когда у пациентов с нарциссической личностной организаций происходит разрешение патологического грандиозного Я, то часто возникают настолько тяжелые осложнения, что терапия

Злокачественный отек (Odema malignum), газовая инфекция, раневой газовый отек, газовая гангрена, газовая флегмона, анаэробная инфекция , — острое спорадическое токсико-инфекционное заболевание всех видов животных и человека характеризующееся быстро распространяющимся воспалительными газовыми отеками и некрозом пораженной ткани.

Злокачественный отек вызывают спорообразующие микроорганизмы, проникающие в организм через раны, травмы, покусы и другие повреждения кожи, слизистых оболочек и более глубоких тканей.

Историческая справка . Заболевание известно с древних времен. В глубокой древности встречались описание крепитирующих отеков у домашних животных после ранений, кастраций, нарушений кожного покрова и слизистых оболочек.

Русский ученый Н.И. Пирогов в 1865 году дал классическое описание газовой инфекции у людей под названием «газовая гангрена». В 1818 году Жирар доказал, что у овец можно вызвать крепитирующий отек подкожными инъекциями гниющих веществ животного происхождения.

Шово (1873) при впрыскивании козам крови, содержащей гнилостную микрофлору, наблюдал на месте инъекции газовые отеки. Р.Кох с сотрудниками в 1881году экспериментально воспроизвели подкожными прививками частичек земли это заболевание и дали ему название «злокачественный отек», которое сохранилось до настоящего времени.

В 1887году французкие ученые Л. Пастер и Жубер впервые выделили из трупа коровы анаэробный микроорганизм и назвали его Vibrion septique. Позднее было установлено, что злокачественный отек представляет собой полиморфное заболевание множественной этиологии. Злокачественный отек в виде спорадических случаев встречается повсеместно и отличается высокой летальностью заболевших животных.

Экономический ущерб , в связи со спорадическим характером болезни небольшой. Иногда злокачественный отек может носить массовый характер и протекать в виде энзоотий и эпизоотий (у овец, свиней), приводя к значительным материальным потерям.

Этиология . Возбудителями злокачественного отека являются анаэробные микробы из рода Clostridium: Cl. Septicum, Cl. Perfringes, Cl. Chauvoei, Cl. Oedematiens, Cl. Histolytcum, Cl. Sordellii, Cl. sporogenes как каждым из этих микробов или в ассоциации друг с другом или различными другими анаэробными микроорганизмами. Болезнь, вызванная ассоциацией микробов, протекает у животных более остро и в более тяжелой форме, отягощая течение патологического процесса.

Все анаэробные возбудители в зависимости от места проникновения (мышцы или внутренние органы) могут соответственно вызывать заболевания типа миозитов или висцеритов эндогенного или экзогенного происхождения.

Возбудители злокачественного отека широко распространены в природе, встречаются в гниющих органических веществах, в почве, в содержимом кишечника животных. С кормом возбудители злокачественного отека попадают в желудочно- кишечный тракт животных, где они при благоприятных условиях размножаются. Зараженные животные, выделяя микробов с испражнениями, способствуют их рассеиванию в окружающей среде.

Различать анаэробных возбудителей злокачественного отека по их морфологическим свойствам достаточно сложно и практически невозможно. Все они (кроме Cl. perfringens) подвижны, не имеют капсул, способны образовывать споры в питательных средах, в организме животных и во внешней среде. Бациллы хорошо окрашиваются водными анилиновыми красками. Молодые культуры грамположительны, старые, как правило, грамотрицательны. Споры располагаются в центре или на концах микробной клетки, расширяя ее в месте расположения. Микробы обнаруживаются в окрашенных мазках поодиночке, попарно, группами, а иногда они собираются в целые цепочки или нити, что особенно характерно для Cl.septicum. Все виды клостридий обладают гемолитическими свойствами.

Культивируют возбудителей в анаэробных условиях в жидких питательных средах (среда Китта — Тароцци). Все они при этом вызывают помутнение среды через 2-18 часов роста. В дальнейшем бактериальная масса оседает равномерным слоем на дно пробирки. Интенсивное газообразование в среде проявляется особенно ярко у Cl. Perfringens, Cl.septicum, что объясняется степенью выраженности их сахаролитических свойств.

Микробы относительно легко дифференцируют по форме колоний, выращенных на кровяном агаре с добавлением глюкозы по прописи Цейсслера. Так, колонии Cl. septicum вуалевидные с нежными отростками, окружены зоной гемолиза;Cl. Oedematiens –бесцветные, круглые, с неровными краями, гемолиз непостоянен; Cl. Perfringens – серые, зеленеющие при доступе воздуха, круглые колонии с зоной непрозрачного гемолиза.

Возбудители злокачественного отека характеризуются протеолитическими и сахаролитическими свойствами.

Из лабораторных животных наиболее восприимчивы ко всем перечисленным микроорганизмам морские свинки, кролики и белые мыши. При подкожном заражении морские свинки погибают через 18-48 часов с характерной для определенного вида микроба патологоанатомической картиной.

Эпизоотология . К злокачественному отеку восприимчивы все виды животных: лошади, овцы, мулы, ослы, крупный рогатый скот, свиньи и, как исключение, плотоядные и птицы, а также и человек. Злокачественный отек распространен повсеместно, особенно там, где длительное время животных содержат скученно, в антисанитарных условиях. Болезнь возникает в любое время года, но чаще в жаркий летний период. Основной резервуар возбудителей – почва, обсемененная споровыми культурами клостридий, выделяемыми больными животными. Споры во внешних условиях сохраняют жизнеспособность годами. Животные заражаются при проникновении спор возбудителя через поврежденные участки кожи и слизистых оболочек в более глубокие участки ткани. Чаще всего, это наблюдается при попадание обсемененных клостридиями кусочков земли, навоза, пыли, фекалий, грязной воды и других объектов.

Болезнь у животных возникает обычно после хирургических операций (кастрации, обработки ран и др.), вакцинаций проводимых загрязненными инструментами или без соблюдения правил асептики, сильных ушибов, травм, осложненных родов и вследствие других причин, когда происходит нарушение целостности кожи и слизистых оболочек, когда в ранки попадают возбудители злокачественного отека. Болезнь возникает, когда споры возбудителя попадают в глубокие мышечные слои, куда из воздуха не поступает кислород, или в разможженные, поврежденные ткани с обильными кровоизлияниями. Возможно заражение злокачественным отеком животных через поврежденный желудочно-кишечный тракт, родовые пути (кровоизлияния, язвы, прободения, механические повреждения), когда микроб проникает в кровь, а затем переносится в поврежденную мышечную ткань, где находит благоприятную среду для размножения.

Патогенез . Споры анаэробных микроорганизмов, попадая на поврежденную или омертвевшую ткань, прорастают и выделяют токсин. Развитию анаэробов способствуют попавшие вместе с ними инородние тела, повреждающие ткани, и аэробные возбудители, поглощающие кислород.

В основе патогенеза лежит токсемия. Интенсивнее всего анаэробные микробы размножаются в соединительной и мышечных тканях, т.к. находят там анаэробные условия и достаточное количество питательных веществ. По мере развития возбудителя в пораженных тканях нарастают процессы ферментативного расщепления белков и углеводов с образованием аминокислот и газов (азота, водорода, аммиака, углекислоты). Интенсивность газообразования зависит от вида возбудителя. Патологический процесс, распространяющийся лимфогенно и гематогенно, и быстрота его течения обуславливаются действием токсинов и продуктов тканевого распада. Токсины нарушают тканевое дыхание, вызывают явления местного ацидоза, повышают кровяное давление, повышают проницаемость сосудистой стенки для форменных элементов крови и плазмы. В результате гемолиза эритроцитов у больного животного развивается анемия. Током крови микробы, токсины и токсинообразные продукты белкового распада тканей доносятся к сосудистым и нервным пучкам и вызывают дегенеративные изменения в печени, надпочечниках и других паренхиматозных органах. При агональном состоянии заболевшего злокачественным отеком животного микробы попадают в кровь и, вследствие замедления тока крови, размножаются в паренхиматозных органах, выделяя при этом газ. Создается характерная картина «пенистых органов». Смерть больного животного наступает от токсемии.

Иммунитет . Установлена возможность как активного, так и пассивного антитоксического иммунитета. После иммунизации животных как моно — , так и поливалентными вакцинами, изготовленными из возбудителей злокачественного отека, формируется достаточно напряженный иммунитет длительностью 4-6 месяцев.

Клинические признаки . Инкубационный период от нескольких часов до 2-3 дней. Клинические признаки злокачественного отека разнообразны в зависимости от вида животного, возбудителя и места его локализации и может протекать в виде миозитов, висцеритов и септицемий.

Первым симптомом злокачественного отека является появление очень болезненной и горячей припухлости, которая в дальнейшем становится холодной и малочувствительной. Болезнь длится до 2-3 суток.

У больных злокачественным отеком животных наблюдаем общие явления: угнетение, отказ животных от корма, затрудненное дыхание, учащенный пульс, ослабление сердечной деятельности, цианоз видимых слизистых оболочек. Температура тела у больного животного повышена, но может оставаться нормальной (перед смертью температура обычно понижается).

Злокачественный отек протекает в виде эмфизематозной формы, отечно-токсической, а также смешанной.

Эмфизематозная форма характеризуется обильной и быстрой газовой инфильтрацией, развивающейся на месте поражения, и последующим распространением этого процесса на здоровые ткани. Мышцы приобретают цвет вареного мяса, при надавливании на них выделяются пузырьки газа и отечная жидкость.

Отечно-токсическая форма характеризуется быстро развивающимся отеком и токсическими явлениями. После травмы вокруг пораженного участка появляется отек, вначале горячий и болезненный. Кожа на месте отека краснеет, затем становится темно-красного и серовато-красноватого цвета. Через некоторое время место отека становится холодным, тестообразным, чувствительность теряется. При проведении пальпации пораженного участка отмечаем крепитацию. При разрезе выделяется желтая или красновато – бурая серозная жидкость. Образовавшийся отек быстро увеличивается и распространяется на окружающие ткани.

У животных часто встречается смешанная форма злокачественного отека, протекающая с явлениями отека и газовой инфильтрации. Обычно, при этой форме, выделяют разнообразную анаэробную микрофлору (Cl. perfringens,Cl. Odematiens и т. д.), а также аэробную. Присутствие среди возбудителей Cl. Histolyticum приводит к протеолизу мышечной ткани, а Cl. Sporogenes – приводит к гнилостному распаду тканей и резкому запаху.

У лошадей, ослов и мулов злокачественный отек часто возникает в связи с ранениями и родами. Возбудителями злокачественного отека являются Cl. perfringens, Cl. septicum, Cl. oedematiens, Cl. histoliticum. Злокачественный отек протекает в форме газовых отеков. У лошадей происходит повышение температуры, дыхание становится тяжелым, отмечаем синюшность видимых слизистых оболочек, кровяное давление падает, пульс учащается до 80-90 ударов в минуты. У отдельных лошадей наблюдается понос. В родовых путях инфекция возникает через 2-5 дней после родов; срамные губы припухают, из воспаленного влагалища выделяется грязно- бурая жидкость неприятного запаха. Затем около наружных половых органов появляется сначала горячая и болезненная, а затем холодная и болезненная крепитирующая припухлость, распространяющаяся на область промежности и живота. Смерть наступает через 12-36, а иногда и 60 часов после появления первых клинических признаков.

Крупный рогатый скот восприимчив к возбудителям газовых отеков. Встречаются случаи заболевания, вызванные Cl.perfringens, Cl. Septiqum и другими анаэробами. Злокачественный отек у крупного рогатого скота развивается после ранений и тяжелых отелов (родильный злокачественный отек Pararauschbrand), выпадения матки, задержания последа. Однако бывают случаи заболевания злокачественным отеком коров после нормальных родов. Злокачественный отек у крупного рогатого скота наблюдается в любое время года. У животных через 1-5 дней после отела вдруг резко повышается температура тела (40-41°С) и учащается пульс. При вагинальном исследовании слизистая оболочка влагалища имеет красный или сине-красный цвет, иногда наблюдаем гнойное воспаление матки. Из половых органов выделяется грязноватая жидкость, имеющая зловонный запах. Отек распространяется по лимфатическим путям и может перейти на бедра, промежность, вымя, область крестца. При клиническом осмотре животные выглядят апатичными, у них появляются потуги, вздутие живота, понос; появляется агалактия. Лимфатические узлы в области вымени и подколенной складки увеличены. Больные животные стоят в согнутом положении. У отдельных больных животных появляется бронхопневмония, кашель, затрудненное дыхание; перед смертью температура тела снижается.

Злокачественный отек в большинстве случаев протекает остро и заканчивается смертью. У отдельных животных картина злокачественного отека напоминает эмфизематозный карбункул. У телят злокачественный отек иногда бывает после удаления рогов.

У овец злокачественный отек встречается как раневая инфекция после стрижки, кастрации, укусов собаками и других ранений, иногда после вакцинации, или как злокачественный отек матки (родильный злокачественный отек, гангрена влагалища, матки). Послеродовый злокачественный отек возникает у овцематок вскоре после окотов, обычно через 12-48часов. После отделения плодовых оболочек у овцематки внезапно повышается температура тела до 42°С, появляется угнетенное состояние, исчезает молоко, слизистая оболочка влагалища становится отечной, темно-красного цвета, из матки и влагалища выделяется грязная густая жидкость с неприятным запахом. Наружные половые органы отечны. Отек вначале болезненный и горячий, распространяется на промежность и нижнюю стенку живота, затем становится безболезненным и холодным. На коже появляются сине-багровые и зеленоватые пятна. Шерсть в области отека легко выдергивается. Лимфатические узлы вымени и коленной складки увеличены. У больных овец отмечается тимпания и понос. Появляются признаки расстройства нервной системы. Овцы стоят с изогнутой спиной. Исход болезни в основном смертельный.

У свиней злокачественный отек чаще всего появляется в виде раневой инфекции как осложнение после операций (кастрация, кровопускание), а также после подкожных и внутримышечных инъекций, проводимых специалистами без соблюдения правил асептики. Злокачественный отек у свиней протекает бурно с образованием крепитирующих отеков. Смерть наступает через 2-5 дней. У свиней злокачественный отек может поражать желудочно-кишечный тракт (брадзотоподобная форма). Возбудитель злокачественного отека попадает в пищеварительный тракт с кормом или питьевой водой и проникает в стенку желудка, где вызывает отек. Злокачественный отек у свиней иногда возникает как осложнение при чуме свиней.

Патологоанатомические изменения различны в зависимости от локализации (скелетная мускулатура – миозиты, внутренние органы – висцериты). Трупы животных павших от злокачественного отека обычно вздуты и быстро разлагаются. Соединительная ткань в области отека пропитана желтой и красноватой, иногда даже гемолитической жидкостью, содержащей пузырьки газа, издающей прогорклый запах; инфильтрацию соединительной ткани можно наблюдать между мышцами, окрашенными или в темно-коричнево-красный цвет до черно-красного, или в светло-желтый. Мышцы легко разрываются или даже ломаются. Межмышечная соединительная ткань может быть пронизана кровоизлияниями. В брюшной полости обнаруживают кровянистую жидкость. Брюшина лишена блеска, ее кровеносные сосуды сильно инъецированы. При злокачественном отеке вызванном Cl. Oedematiens, отечная жидкость, никогда не бывает гемолитичной, а имеет желтую окраску и не содержит пузырьков газа. При смешанной инфекции с Cl. Septicum патологоанатомические изменения стерты. При послеродовом злокачественном отеке подкожная соединительная ткань в области таза отечна, инфильтрирована и содержит пузырьки газа. На прилегающих ягодичных мышцах, а также на мышцах бедра наблюдают аналогичные изменения. Стенки матки отечны, слизистая оболочка покрыта грязноватой с неприятным запахом кашицеобразной массой, нередко содержащей разложившиеся кусочки последа. В тех случаях, когда злокачественный отек локализуется в пищеварительном тракте (у свиней, овец), стенка желудка значительно утолщена, слизистая оболочка отечна, иногда геморрагична, подслизистая и субсерозная ткань, а также мышечный слой отечны, инфильтрированы, пронизаны пузырьками газа с прогорклым запахом. Лимфатические узлы увеличены, селезенка – в пределах нормы, но может быть пронизана пузырьками газа, в печени и почках иногда находят порозные, желто-серые очаги. В легких – гиперемия и отек. В мышцах сердца – паренхиматозное перерождение; кровь свернувшаяся.

Диагноз может быть установлен прижизненно по клинической картине и посмертно – по патологоанатомическим изменениям, а также микроскопией мазков из паренхиматозных органов пораженных мест; подтверждается выделением патогенных анаэробных возбудителей газового отека. Материалом для бактериологического исследования могут служить кусочки пораженных мышц, тканевой экссудат, пораженные эмфизематозные органы, отрезки кишечника, сычуга и т.п. кроме того исследуют различные объекты: перевязочный материал, инструменты, биопрепараты, медикаменты, предназначенные для инъекций, которые могут быть источником заражения анаэробами.

Дифференциальный диагноз . Злокачественный отек необходимо отличать от . От . В сомнительных случаях проводят бактериологическое исследование.

Лечение . Делают широкие продольные разрезы кожи и подкожной клетчатки в области отека, удаляют инфильтрат и омертвевшие участки тканей. Это открывает доступ кислорода в рану, чем создаются неблагоприятные условия для анаэробов. Рану обрабатывают перекисью водорода или раствором марганцовокислого калия. Показаны также внутривенные вливания 4%-ного раствора норсульфазола в дозе 50-100мл. внутримышечные инъекции антибиотиков, в том числе и современных цефалоспоринового ряда.

Профилактика и меры борьбы . Необходимо строго соблюдать асептику при различных манипуляциях, связанных с операциями или возможностью повреждения кожи (кастрация, обрезание хвостов, ушей, снятие рогов, стрижке и т.п.) и предохранять раны от загрязнения. Своевременно проводить обработку ран с иссечением пораженных тканей. Для предупреждения газового отека родовых путей необходимо производить антисептическую обработку рук и инструментов. При тяжелых родах и задержании последа больным животным рекомендуется внутримышечно вводить антибиотики, орошая их половые пути дезинфицирующими веществами. Помещения, в которых находились больные животные и предметы ухода, бывшие в соприкосновении с больными или павшими животными, дезинфицируют. Уборку трупов и дезинфекцию мест, где они находились, проводят в соответствии с требованиями и правилами о ветеринарно-санитарном надзоре за уборкой, утилизацией и уничтожением трупов. У овец профилактику злокачественного отека проводят поливалентным анатоксином.

ФГОУ ВПО «Московская Государственная Академия Ветеринарной Медицины и Биотехнологии им. К.И. Скрябина»

по микробиологии на тему

«Возбудители злокачественного отека»

Преподаватель:

Бурлакова Галина Ивановна

Выполнил:

Студент 3-го курса 1-й группы факультета ветеринарной медицины ФИО

Москва, 2007

Введение

Злокачественный отек (газовая инфекция, раневой газовый отек, анаэробная инфекция, газовая гангрена) - острая неконтагиозная ра­невая инфекция, вызываемая группой патогенных клостридий.

Заболевание характеризуется быстро распространяющимся болез­ненным отеком мягких тканей, их разрушением, образованием в пора­женных тканях газа и общей интоксикацией организма. Встречается злокачественный отек в виде спорадических случаев повсеместно. Обыч­но заболевание развивается после обширных и глубоко проникаю­щих ранений. Болезнь поражает животных и человека. У крупного рога­того скота злокачественный отек может наблюдаться после отелов, особенно после тяжелых родов, сопровождающихся повреждениями и ранениями родовых путей, а также после абортов.

Злокачественный отек - заболевание полимикробной этиологии. В развитии инфекционного процесса основную роль играют следующие виды бактерий из рода клостридиум: Cl.septicum,Cl.ovyi,Cl.perfringens,Cl.histolyticumCl.sordellii. У сельскохозяйственных животных возбудителем заболевания чаще являетсяCl.septicum, нередко наблюдается смешанная инфекция. У овец возбудителем может бытьCl.chauvoei(Ф. И. Каганф, Л. В. Кириллов, 1976). В пораженных тканях иногда обнаруживают протеолитическую анаэробную бактериюCl.sporogenes, которая способствует гнилостному распаду тканей, в результате чего осложняется течение болезни. Выделяют и сопутствующую аэробную микрофлору (стрептококки, стафилококки, кишечная палочка, протей).

Clostridiumseptiсum

Clostridiumseptiсum(Vibrionseptique) - анаэробная бактерия, выделена из трупа коровы Пастером и Жубертом в 877 г

Cl.septicum- полиморф­ная грамположительная бескапсульная подвижная палочка (перитрих), длиной 2-10 мкм и шириной 0,8-2 мкм. Споры овальной формы, располагаются центрально или субтерминально, образуются в культурах и трупе. В мазках из культур находят отдельные палочки, цепочки и нити. В препаратах-отпечатках из серозных покровов печени и других органов обнаруживают длинные нити.

Культивирование. Cl.septicum- строгий анаэроб. Оптимальная температура 37°С, рН 7,6. На среде Китт-Тароцци растет интенсивно, через 16-24 ч наступает равномерное помутнение среды с газообразо­ванием. Через 48 ч микробы оседают на дно и бульон просветляется. При росте в мозговой среде почернения не наступает, но образуется газ. В агаре столбиком растет в виде нежных хлопьеподобных колоний диа­метром 1 -2 мм с уплотненным центром и радиально отходящими пере­путанными нитями, а на поверхности кровяного агара с глюкозой (агар Цейсслера) - в виде кружевных сплетений нитей-арабесок с зоной гемолиза. Молоко свертывается медленно (через 3 -5 дней), пептонизации сгустка казеина нет.

Биохимические свойства. Ферментирует с образованием кислоты и газа глюкозу, лактозу, галактозу, мальтозу, левулёзу и салицин, не раз­лагает глицерин и маннит. Очень редко разлагает сахарозу. Это свойст­во используется при дифференциальной бактериологической диагностике для идентификацииCl.septicumиCl.chauvoei, так как последний мик­роб сахарозу ферментирует постоянно. Разжижает желатину и сверты­вает лакмусовое молоко с образованием кислоты и газа. Не перевари­вает коагулированную сыворотку и яичный белок, не образует индола, обычно не восстанавливает нитраты в нитриты и не вырабатывает боль­шого количества сероводорода.

Устойчивость. Вегетативные формы микроба быстро гибнут под влиянием различных факторов внешней среды, они довольно чувстви­тельны к кислороду. Споры относительно устойчивы и выдерживают кипячение в течение 2-15 мин. В почве этот микроб может вегетировать и сохраняться годами.

Патогенность. Cl. septicum синтезирует высокоактивный экзотоксин сложного состава. Токсин может быть выделен из фильтрата культур на бульоне Мартена (рН 7,6 -7,8), на средах из кислотного и ферментативного гидролизата казеина. В составе токсина обнаруживают четыре раство­римых компонента (α, β, γ, δ). Альфа-токсин - кислородостабильный летальный, некротический и гемолитический фактор. Бета-ток­син - кислородолабильный гемолизин. Является ферментом дезоксирибонуклеазой. Вызывает быстрый гемолиз. Нейтрализуется анти­сывороткой Cl. perfringens. Гамма-токсин - фермент гиалуронидаза. Дельта-токсин - кислородолабильный гемолизин, лизирующий эритроциты барана, лошади и человека. В культуральных фильтратах этого микроба, кроме указанных токсических компонентов, обнаружены еще фибринолизин и коллагеназа, которые могут играть некоторую роль в деструктивных процессах при газовой гангрене.

Антигенная структура. В составе CI. septicum выделены О- и Н-ан-тигены. Установлено, что имеется общность споровых антигенов у С1. septicum и CI. chauvoei, но они могут четко дифференцироваться по О-антигену. С помощью Н-агглютинации внутри вида Cl. septicum выяв­лено шесть серологических групп.

Clostridium novyi

Clostridium novyi (Cl. oedematiens) выделен Нови в 1883 г. из трупа морской свинки, его этиологическая роль как возбудителя га­зовой гангрены установлены в 1915 г. Вейнбергом и Сегеном.

Морфология и тинкториальные свойства. Крупная полиморфная прямая или слегка изогнутая с закругленными, иногда обрубленными краями палочка, длиной 4 -8 мкм и шириной 1 -1,5 мкм; бактерии могут располагаться короткими цепочками по 3 -5 и более клеток. Капсул не образует. В молодых культурах палочки подвижны (перитрихи), в присутствии кислорода подвижность быстро теряется. Образует круглые или овальные субтерминальные споры, которые обычно обнаруживаются через 24 ч роста культуры. Процесс спорообразования более интенсивный на щелочных средах, обедненных питательными ве­ществами и разлагаемыми углеводами. Хорошо окрашиваются спиртоводными растворами обычных анилиновых красок. Молодые вегетатив­ные клетки грамположительные, из старых культур - грамотрицательные.

Культивирование. Cl. novyi - один из наиболее строгих анаэробов. Оптимальная температура 37°С, рН 7,8. На среде Китт - Тароцци дает обильный рост со сплошным помутнением и слабым газообразованием. Культуры издают неприятный запах. На кровяном агаре с глюкозой растет в виде шероховатых серого цвета плоских колоний с неправильными бахромчатыми краями и отростка­ми, образующими на периферии колоний параллельные петли. Ко­лонии окружены зоной гемолиза. Мозговая среда не чернеет. Молоко свертывается медленно с выпадением мелких хлопьев, пептонизация не наступает.

Биохимические свойства. Сахаролитические свойства выражены слабо и различны у отдельных типов. Cl. novyi типа А, В и С фермен­тирует глюкозу, фруктозу и мальтозу, а тип D только глюкозу; глицерин разлагают все типы, кроме некоторых штаммов типа В. Способность разлагать углеводы изменяется в зависимости от штамма. Протеолитические свойства выражены слабо. Желатина разжижается медленно, свернутая сыворотка крови, вареное мясо, казеин и свернутый яичный белок не разжижаются. Нитраты восстанавливаются в аммиак без про­хождения стадии нитритов. Сульфаты не восстанавливаются в серово­дород, индол не образуется.

Устойчивость. Вегетативные формы по своей устойчивости не отли­чаются от других видов патогенных анаэробов. Они погибают от воз­действия прямых солнечных лучей через 24 -48 ч, ультрафиолетовых лучей через 20 -30 мин. Нагревание до 80°С убивает их за 20 мин, ки­пячение -за 5 мин. Споры могут сохраняться в почве в течение 7 -8 лет и выдерживать кипячение 1 -2 ч.

Патогенность. Злокачественный отек, обусловленныйCl.novyiможет возникать вследствие любого ранения, инфицированного этим возбудителем. Исход болезни, как правило, смертельный.

Cl.novyiв организме и при росте на элективных питательных сре­дах синтезирует и выделяет очень активный и сложный токсин, в соста­ве которого обнаружено восемь компонентов. К числу лучше изученных относят альфа-, бета-, гамма- и дельта-токсины. Альфа-токсин - термолабильный, летальный, некротический, капиллярный яд. Вызывает нек­роз тканей, желатинозный отек и гибель животных. Бета-токсин - фосфорлипаза С (лецитиназа). Обладает некротическим, гемолитическим и летальным действием. Гамма-токсин -фосфорлипазаD. Некротизирующий и гемолитический факторы. Дельта-токсин - кислородолабильный гемолизин. ЭкзотоксинCI.novyiпо активности превосходит ток­сины других возбудителей газовой гангрены. Он сильнее других токси­нов угнетает фагоцитоз и обладает четким гемолитическим действием, которое нейтрализуется специфической антитоксической сывороткой, ему присущи летальные и некротические свойства и диффузионная актив­ность. Токсин разрушается при нагревании до 50°С в течение 30 мин. Этот микроб также образует ферменты патогенности - гиалуронидазу, фибринолизин, дезоксирибонуклеазу, протеин азы.

Антигенная структура. По составу растворимых антигенов токсина различают четыре типаCl.novyi-А, В, С иD.

Тип А - l.novyi(Cl.oedematiens) -вызывает газовую гангрену у человека и животных, выделяется также при брадзоте. Вырабатывает альфа-, гамма- и дельта-токсины. Тип В -Cl.gigas- является возбу­дителем брадзота овец, инфекционного некротического гепатита овец, а также газовой гангрены человека и травоядных. Может вызывать у крупного рогатого скота и свиней инфекционный некротический гепатит. Вырабатывает альфа- и бета-токсины. Тип С -Cl.bubalorum- вызывает хронический остеомиелит у буйволов, продуцирует гамма-токсин. ТипD-Cl.haemolyticum- вызывает инфекционную иктерогемоглобнурию у крупного рогатого скота, очень редко у овец и в единичных случаях у свиней. Синтезирует бета-токсин, а также эта- и тэта-токсины. Первый из них фермент тропомиозиназа, расщепляет миозин и повреж­дает мышцы.

Clostridiumperfringens

Clostridiumperfringens(Вас.perfringens,Cl.welchii) открыт и описан в 1892 г. Уэлчем и Нетталом. Широко распространен в природе и встречается повсеместно, особенно большое количество его обнаруживают в почве, богатой гумусом. Патогенные штаммы микроба выделяются из почвы главным образом в местах, где почва загрязняется фекалиями животных. Основной резервуар сохранения патогенных штаммов - здоровые животные, в желудочно-кишечном тракте которых интенсивно размножается Cl. perfrigens и выделяется с фекалиями во внешнюю среду. Так происходит загрязнение кормов, пастбищ, почвы вначале вегетативными формами, а затем спорами: микроб быстро спорулирует и длительное время сохраняется.

Cl. perfrigens - самый нетребовательный анаэроб, очень активный в биохимическом отношении и весьма патогенный.

Морфология и тинкториальные свойства. CI. perfringens всех ти­пов - неподвижные без жгутиков с закругленными концами довольно толстые палочки длиной 4-8 мкм и шириной 0,6-1,5 мкм. Под воздействием различных факторов (антибиотики, состав среды и др.) форма бактерий может сильно изменяться. Поэтому в культуре наряду с типичными клетками обнаруживают короткие толстые палоч­ки, почти кокковидной формы или же длинные с заостренным краем ни­ти, достигающие 100-145 мкм. Палочки нередко бывают изогнутыми. В организме животных микроб образует капсулу. При выращивании на щелочных средах, богатых белками и несодержащих углеводы, образует крупные овальные центральные или суб­терминальные споры. Спорообразование также происходит на свернутой лошадиной сыворотке и особенно интенсивно при засеве молодой куль­туры на влажный песок, который медленно подсушивается.

Эта бактерия хорошо красится метиленовым синим и другими основными красками. В молодых культурах грамположительна, в ста­рых - грамотрицательна.

Культивирование. Cl. perfringens не относится к строгим анаэробам. На среде Китт-Тароцци дает равномерную муть и газообразова­ние уже через 2-3 ч после посева. Газообразование происходит за счет сбраживания глюкозы и изомальтозы при расщеплении гликогена мышц или печени, находящихся в среде. Через 3-5 дней среда просветляется и на дно выпадает обильный белый осадок за счет осевших микробов. Культура издает запах масляной кислоты. Рост также можно получить на простом бульоне с глюкозой. При росте на кровяном агаре, по Цейс-слеру, через 12 -18 ч образуются мелкие (до 2-4 мм) колонии, мутные или сероватые, окруженные одной или двумя зонами гемолиза; в дальнейшем под влиянием кислорода эти колонии становятся зеленоватыми.

Существует три устойчивых варианта колоний: гладкий (S) сли­зистый (М) и шероховатый (R), иногда появляется смешанный ва­риант. Гладкие колонии на пластинке агара в начале роста напоминают нежные капли росы, затем теряют прозрачность и приобретают серова­тую или белую окраску. Они круглые, сочные, куполообразные с глад­кой блестящей поверхностью и ровным краем. В сахарном агаре столбиком колонии имеют чечевицеобразную форму. В мазках из S-форм Л колоний обнаруживают короткие бескапсульные клетки. Слизистые (М) колонии похожи на гладкие и отличаются более высоким куполом и слизистой консистенцией обнаруживают капсульные клетки. Шероховатые колонии неправильной формы, с изрезанным «фестончатым» краем, иногда с отростками в виде шипов, поверхность их не­ровная, бугристая. В мазках обнаруживают нити или цепочки из корот­ких палочек.

На молоке через 16-24 ч появляется плотный губчатый сгусток, часто приподнятый газом до пробки, молочная сыворотка в такой про­бирке прозрачная. При росте на среде Вильсон-Блера в результате восстановления железы уже через 2-4 ч наступает сплошное почерне­ние агарового столбика и одновременно сильное газообразование. Моз­говая среда не чернеет.

Биохимические свойства. Cl. perfringens обладает слабыми протеолитическими свойствами. Свернутую сыворотку и вареные кусочки мяса разжижает медленно (на 2 -7-й день). Однако у большинства штаммов типа А протеолитическая активность выражена в значительной степени. Этот микроб вырабатывает ферменты, расплавляющие через 24 ч же­латину. Характерное свойство для Cl. perfringens - способность свер­тывать лакмусовое молоко с образованием сгустка кирпичного цвета и полным просветлением молочной сыворотки. Все штаммы сбраживают с образованием кислоты и газа глюкозу, галактозу, мальтозу, лактозу, левулёзу, сахарозу и не ферментируют маннит и дульцит. Некоторые штаммы могут разлагать глицерин и инулин. Синтезирует ферменты патогенности: лецитиназу, кроллагеназу, дезоксирибонуклеазу, гиалуронидазу.

Устойчивость. Вегетативные клетки малоустойчивы, резистентность же спор напротив очень высокая. Имеются данные, что споры различных штаммов типа А этого вида микроба выдерживают температуру 100 °С в течение 1 -3 ч.

Патогенность. Все типы Cl. perfringens способны вызывать газовую гангрену у человека и животных. Отдельные варианты являются возбу­дителями специфических инфекционных процессов у различных видов животных: брадзота овец, анаэробной дизентерии ягнят, энтеротоксемии овец, телят и т. д.

Особенности действия культур и культуральных фильтратов Cl. perfringens на лабораторных животных зависят от штамма, пита­тельной среды, на которой получена культура, от спектра главных летальных токсинов, вырабатываемых данным штаммом, а также от пути введения культуральной жидкости и количества смертельных доз ток­синов.

Cl. perfringens вырабатывает сложный экзотоксин - сложный комп­лекс, образующий не менее 15 факторов патогенности.

Основными токсическими факторами являются: альфа-токсин - фосфолипаза (лецитиназа С) - один из главных факторов, обладаю­щий летальным, некротическим, гемолитическим и цитопатогенным дей­ствием. Бета-токсин - летальный некротический фактор. Гамма-токсин представляет собой летальный, не обладающий гемолитической активно­стью фактор. Дельта-токсин - летальный и гемолитический яд. Эпсилон-токсин - летальный некротический протоксин, активирующийся трипси­ном. Тэта-токсин характеризуется резко выраженными гемолитическими и в слабой степени летальными и некротическими свойствами. Йота-ток­син летальный, некротический протоксин, активирующийся трипси­ном. Каппа-токсин представлен коллагеназой, действующей на нативный коллаген. Лямбда-токсин - желатиназа, действующая на денатуриро­ванный коллаген и желатину. Ми-токсин – гиалуронидаза. Ни-токсин - дезоксирибонуклеаза. В составе экзопродуктов обнаружены также нейраминидаэный, плазмокоагулазный компоненты - и фибринолитический фермент. Сложный состав экзопродуктов бактерий этого вида определяет разностороннее действие и спектр патогенности.

Антигенная структура. ДифференциацияCI.perfringensна типы основан на свойстве преимущественного выделения различных леталь­ных токсинов, обладающих биологическим действием и нейтрализуемых специфической антисывороткой. Описано шесть типов (сероваров)Cl.oerfringens: А, В, С,D,E,F.

Тип А - Cl. perfringens Тур A (Cl. Welchn) - вызывает газовую гангрену (злокачественный отек) у людей и животных, пищевые токсикоинфекции у людей, является основным возбудителем энтеротоксемии телят и взрослых свиней, может также вызывать некротический мастит овец коз и крупного рогатого скота. Вырабатывает альфа-, тэта- и кап­па-токсины.

Тип В - Cl.perfringensТур В (Lambdysenterybacillus) - вызы­вает анаэробную дизентерию (некротический энтерит) ягнят, козлят, те­лят поросят, жеребят и цыплят. В числе токсических компонентов обнаруживают альфа-, бета-, эпсилон-токсины, а также протеиназа и гиалуронидаза.

Тип С - Cl.perfringensТур С (Вас.paludis) -вызывает геморра­гическую энтеротоксемию овец, иногда энтеротоксемию телят, ягнят, по­росят, коз и верблюдов. Синтезирует альфа- и бета-токсины.

Тип D-Cl.perfringensТурD(Вас.ovitoxicus) -является возбу­дителем инфекционной энтеротоксемии овец («мягкая» почка), выделя­ется также при энтеротоксемии коз, телят и при «травяной болезни» у лошадей. Обладает альфа- и эпсилон-токсинами.

Тип Е - Cl.perfringensТур Е - выделен при энтеротоксемии те­лят и ягнят. Имеет альфа- и йота-токсины, а также активные коллаге-назу и протеиназу. ТипF-Cl.perfringensТурF(Вас.enterotoxicus) - описан как возбудитель некротического энтерита людей, выделяет аль­фа- и бета-токсины.

Clostridiumhistolyticum

Clostridiumhistolyticum(греч. - растворяющий ткани) выделен в 1916 г. Вейнбергом и Сегеном из раневого содержимого че­ловека, пораженного газовой гангреной. При раневой анаэробной инфек­ции обнаруживают реже других микробов, не более чем в 1 -18 % случаев. Как правило, встречается в ассоциаций с другими патогенными клостридиями, значительно осложняя течение болезни. У лошадей из­вестны случаи, когдаCl.histlyticumбыл единственным возбудителем раневой инфекции. Этот микроб является естественным обитателем ки­шечника человека и животных.

Морфология и тинкториальные свойства. Среди других патогенных анаэробов О.histolyticumсамый небольшой микроб. Это грамположительная палочка длиной 3 -5 мкм и шириной 0,2-0,5 мкм, хорошо об­разующая в старых культурах овальные, расположенные центрально или субтерминально (в виде игольного ушка) споры; в организме споры не формируются. Перитрих, подвижный в свежих культурах. Капсулу не имеет. Легко окрашивается спиртоводными растворами анилиновых красок.

Культивирование. Нестрогий анаэроб. В аэробных условиях дает слабый рост и не образует спор. На среде Китт-Тароцци растет без га­зообразования, в виде равномерного помутнения с последующим про­светлением среды и образованием осадка. При росте на агаре с кровью, по Цейсслеру, через 24-48 ч отмечаются мелкие росинчатые колонии диаметром 0,5-1 мм, они полусферические, прозрачные, блестящие с ровным краем и узкой зоной гемолиза вокруг. Чаще гемолиз отсутству­ет. Старые колонии теряют прозрачность, становятся серыми или белы­ми с неровными краями. В глубине сахарного агара столбиком штаммы, обладающие подвижностью, образуют колонии-пушинки с уплотненным центром. Неподвижные штаммы формируют колонии-чечевицы, иногда с отростками. На мозговой среде на 2-3-и сутки роста начинается почернение максимум которого наступает на 7 -9-й день.

Биохимические свойства. Этот микроорганизм не ферментирует ни один из сахаров. Только некоторые штаммы сбраживают глюкозу, кислоту при этом не обнаруживают, она нейтрализуется аммиаком, образующимся при протеолизе белков. Обладает высокой протеолитической активностью, разлагая желатину, свернутую сыворотку, яичный белок, коллаген. Кусочки нативных мышц, помещенные в жидкую питатель­ную среду интенсивно растущей культуройCl.histolyticum, подверга­ются быстрому протеолизу. Индол не образуется, сероводород в куль­турах выделяется в значительном количестве.

Устойчивость. Устойчивость сравнима с другими патогенными анаэрооами - воз­будителями газовой гангрены. Однако устойчивость спор может меняться в зависимости от штамма, но обычно они погибают при кипячении в течение 1 ч.

Патогенность. На жидких средахCl.histolyticumобразует сложный термолабиль­ный токсин, в составе которого обнаружено пять компонентов. Альфа-токсин - летальный, некротический яд. Поражает центральную нерв­ную систему: при внутривенном его введении гибель животных наступа­ет при явлениях судорог и конвульсий. Бета-токсин - коллагеназа, разрушает нативный и денатурированный коллаген, а также желатину. Гамма-токсин - протеиназа, активируется цистеином, разрушает жела­тину и казеин, на коллаген не действует. Дельта-токсин - эластаза, протеолитический фермент. Эпсилон-токсин - гемолизин, чувствителен к действию кислорода.Cl.histolyticumсинтезирует также дезоксирибо-нуклеазу. Среди токсических компонентов этого микроба преобладают протеолитические ферменты.

Антигенная структура. Антигены бета-, гамма- и дельта-токсинов различны и нейтрализуются только гомологическими антисыворотками.

Clostridium sordellii

Clostridium sordellii (Cl. oedematoides, Cl. oedematis sporogenes). Выделен Сорделлив 1922 г. при заболевании газовой гангреной человека. Этот способ рассматривают как патогенный вариант.

Морфология и тинктоиальные свойства. Cl.sordellii- полиморфные палочки с закругленными концами длиной 3-8 мкм и шириной 1,2-1,5 мкм. Бактерии распологаются изолированно по 2-3 вместе редко цепочками. Образует овальные, центральные или субтерминальные споры, обнаруживаемые в культурах. Имеет жгутики, перетрих, активно подвижен в молодых культурах. Капсулу не синтезирует. По Грамму красится положительно.

Культивирование. Относится к строгим анаэробам. На среде Китт-Тороции в течение 24 ч дает интенсивное помутнение и газ, в старых культурах часто образуется слизь в виде нитей, культуры издают неприятный гнилостный запах; на кровяном агаре, по Цейсслеру, через 24-48 ч появляются слабо выпуклые серовато-белые колонии с неров­ными краями, окруженные узкой зоной гемолиза. В глубине агара столбиком колонии имеют форму чечевицы, иногда с выростами по краю. Биохимические свойства. Ферментирует глюкозу, мальтозу, фрукто­зу и не расшепляет лактозу и сахарозу. Синтезирует активные протеазы, уреазу и фибринолизин. Молоко пептонизирует, разжижает желатину и свернутую сыворотку, переваривает мясо и яичный белок. Вырабатыва­ет аммиак и сероводород, индола не образует, нитраты в нитриты не восстанавливает.

Патогенность. Этот микроб обнаруживался у крупного рогатого ско­та при заболевании анаэробной гемоглобинурией и энтеротоксемией, а также при брадзоте и энтеротоксемии овец.

Вирулентные штаммы Cl.sordelliiвырабатывают высокоактивный термолабильный летальный, некротический токсин, вызывающий жела­тинозный отек (разрушается при 60 °С). Этот токсин напоминает альфа-токсинCl.novyiи нейтрализуется специфической антисывороткой. Син­тезирует также лецитиназу С, лизирующую эритроциты мышей, в мень­шей степени - кролика и почти не действует на эритроциты овцы. Имеет общие антигенные субстанции с лецитиназойCl.perfringensА. Выра­батывает гиалуронидазу и кислотолабильный гемолизин типа тэта-ток­синаCl.perfringens. Ферментами патогенности у этого микроба также являются уреаза и фибринолизин.

Диагностика.

Материалом для бактериологического исследования служат тканевый экссудат, кусочки пораженных мышц, паренхиматоз­ные органы, а от трупов овец, кроме того, часть сычуга и тонкого отдела кишечника с содержимым (для одновременного исследования на брадзот и энтеротоксемию). При исследовании материала проводят микроско­пию мазков, посевы на питательные среды, заражение лабораторных животных.

Мазки окрашивают по Граму и Муромцеву. Наличие в препаратах большого количества грамположительных палочек служит ориентиро­вочным признаком при подозрении на клостридиальную инфекцию. Предложен также люминесцентно-серологический метод идентификации патогенных анаэробов, однако он еще недостаточно разработан для ши­рокого практического применения.

Свежий материал пастеровской пипеткой засевают на среду Китт-Тароцци, а также МПБ и МПА. Среду Китт -Тароцци предварительно регенерируют - прогревают на водяной бане при 100°С в течение 15-30 мин, после чего быстро охлаждают до 45-50°С. Если материал несвежий, то готовят суспензию на физиологическом растворе, прогре­вают ее 15-20 мин при 80 °С с целью разрушения вегетативных клеток сопутствующих бактерий и проводят высевы. Одновременно материал засевают на глюкозо-кровяной агар в чашках. Посевы инкубируют в анаэробных условиях 24-48 ч, после чего изучают рост на среде Китт-Тароцци и глюкозо-кровяном агаре. Устанавливают морфологию и по­движность бактерий из культур на среде Китт-Тароцци.

С жидкой питательной среды для выделения чистой культуры де­лают дробные посевы на чашки с глюкозо-кровяным агаром. Наличие характерных колоний и крупных грамположительных палочек в мазках дает основание для постановки предварительного микробиологического диагноза. В ряде случаев возникает необходимость изучить биохимиче­ские показатели выделенной культуры. Сахаролитические свойства опре­деляют путем посевов на полужидкий агар с углеводами и индикатором, протеолитические - посевами на молоко, мозговую среду, желатину и свернутую сыворотку.

Диагноз подтверждается биологическим исследованием. С этой целью производят подкожное или внутримышечное заражение морских свинок взвесью из патологического материала в дозе 1 мл и наблюдают за ними 7-8 дней. При наличии возбудителей злокачественного отека животные погибают через 16-48 ч с характерными патологоанатомическими изменениями, вызываемыми определенным видом анаэроба.

Для определения вида возбудителя применяют реакцию нейтрали­зации. Культуру или ее центрифугат в дозе 0,2 мл вводят внутривенно (можно внутрибрюшинно) белым мышам или по 0,1 мл внутрикожно морским свинкам. В случае гибели мышей в течение первых суток или появления некроза кожи у морских свинок ставят реакцию нейтрализации на мышах и морских свинках с диагностическими сыворотками О. регfringensтипаA,Cl.novyiтипов А и В,Cl.septicum,Cl.histolyticumиCI.sordelliiпо приведенной схеме.

Смеси токсин-антитоксин выдерживают 40 мин при 37°С в термо­стате и затем вводят по 0,5 мл внутривенно белым мышам из расчета две мыши на каждую пробирку или по 0,2 мл внутрикожно морской свинке. Результаты учитывают через 5-6 ч и окончательно на третьи сутки. Видовую и типовую принадлежность изучаемой культуры устанавливают по нейтрализующему действию гомологичной антитоксиче­ской сыворотки.В связи со спорадичностью, полимикробностью этио­логии и быстрым течением болезни активная профилактика злокачественного отека не нашла практического применения. Когда имеется угроза инфицирования травматических повреждений, рекомендуется пас­сивная иммунопрофилактика поливалентной антитоксической сывороткой, а также применение антибиотиков широкого спектра и пролонгиро­ванного действия. При лечении газовой инфекции основным мероприятием является возможно ранняя хирургическая обработка очага поражения. Раны орошают слабыми растворами марганцовокислого калия, перекиси водорода, хлорамина и присыпают сульфамидными препаратами и антибиотиками.